AAV CAG-DIO-ChIEF-tdTOMATO (30 µl)

AAV1-CAG-DIO-ChIEF-tdTOMATO是一种预制的1型重组腺相关病毒（rAAV），它将如卡通图所示，在CAG启动子（也称为CBA启动子）的驱动下，依赖Cre重组酶过表达DIO-ChIEF-tdATO。

ChIEF是通道型视紫红质1和2的杂交体，具有额外的L170I突变（ChR1编号）或L131I突变（ChR2编号），这导致卵母细胞和HEK细胞中产生巨大的电流，并且具有几乎与野生型相似的开放状态寿命。ChIEF作为光门控离子通道发挥作用，对于许多生物工程和神经科学应用非常有用，例如通过光刺激神经元来探测神经回路。使用tdTOMATO标记的ChIEF，可以在完整的大脑组织中识别出受光刺激的轴突和突触。这对于研究突触可塑性诱导过程中的分子事件非常有用。ChIEF还被用于绘制大脑一侧到另一侧的长程连接，以及绘制单个神经元树突树上特定输入的空间位置。

在DIO（双flox反向开放阅读框）方案中，目标转基因相对于5'启动子以反向取向插入，并由方向的loxP和lox2272位点侧翼包围。在缺乏Cre表达的情况下，该转基因不会产生。在Cre表达存在的情况下该转基因将被“翻转交换”或FLEX化，从而导致转基因的表达。这是由于侧翼转基因发生了永久性的Cre介导重组/反转。这种排列被称为DIO（双flox反向开放阅读框）、Cre-ON、Flex-rev（反向）、Flex-ONFlexON，或DIO-AAV/AAV-DIO（AAV中的双flox反向开放阅读框）。