Caspase-3/7凋亡检测试剂盒提供了一种简单可靠的方法，通过测量caspase-3/7活性来细胞凋亡。该试剂盒可用于使用荧光计或荧光微孔板读数仪持续监测细胞提取物和纯化酶剂中的caspase-3/7活性。
该检测采用一种由罗丹明110衍生的底物（Z-DEVD-R110），这是一种无光的双酰胺化合物。在酶切作用下，该底物通过两步过程发生转化：首先转化为荧光单酰胺，然后转化为荧更强的R110产物。两种水解产物均表现出与荧光素相似的光谱特性，其最大激发和发射波长496 nm和520 nm。
除了Z-DEVD-R110底物外，该试剂盒还包括可逆醛抑制剂Ac-DE-CHO和参考标准品R110。Ac-DEVD-CHO抑制剂可用于确认诱导细胞群和对照细胞群中的荧光均特异性地源自caspase-3/7的活性。参考标准品则可用于定量反应过程中释放的R110的量。
产品特色
• 简单可靠：直接测量caspase-3/7活性以检测细胞凋亡。
• 连续监测：追踪细胞提取物和纯化酶制剂中的活性。
• 非荧光底物：Z-DEVD-R110在酶切后产生明亮的荧光。
• 特异性对照：Ac-DEVD-CHO抑制剂证实信号依赖于caspase-3/7。
• 定量能力：R110参考标准可实现精确的产品定量。
规格
1. 平台：微孔板读数仪，荧光计。
2. 检测方法：荧光法。
3. 激发/发射波长：496/520 nm。
产品应用
半胱天冬酶活性测定。
产品组分
1. 细胞裂解缓冲液：10 ml。
2. 细胞测定缓冲液：10 ml。
3. 酶底物 Z-DEVD-R110：250 µl。
4. 酶抑制剂 Ac-DEVD-CHO：20 µl。
5. 标准品 R110：1 ml。
存储条件
储存于-20°C并避光保存。
案例
使用Caspase-3/7凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞的凋亡活性。细胞要么在37C下用10 μM喜树碱处理4小时以诱导凋亡（诱导组），要么不处理（对照组）。随后，按照试剂盒说明书所述方法收集、裂解并检测诱导组和对照组细胞。反应在室温下进行，在指定时间后，荧光微孔板读数仪在470 ± 10 nm激发波长和520 ± 10 nm发射波长下荧光。
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