定制DNA文库
DNA文库是指已克隆至载体中的大量DNA序列的集合。从事蛋白质工程、抗体工程、酶工程、合成生物学、生物发现(discovery biology)及结构生物学等领域的生命科学研究人员,可以从中筛选并分离出感兴趣的DNA片段,以进行深入研究。LIFESCT在基因合成领域拥有多年经验,能够为客户提供多种定制化DNA文库构建服务。
定点突变文库
定点突变文库的构建过程,是将特定氨基酸位点(由客户指定)依次替换为其他 19 种氨基酸,从而生成一个突变体文库。该方法使科研人员能够开展结构与功能分析,考察特定氨基酸替换所产生的影响——无论是正面影响还是负面影响。
通量
独立的、经100%序列验证的克隆
交付形式
1. 2–5 µg 冻干质粒 DNA
2. 限制性酶切图谱
3. 测序原始数据及比对结果
4. 合成基因(单独或亚克隆至载体中)的序列文件
扫描文库
扫描文库是指通过定点突变技术,将客户指定区域内的特定残基依次替换为某一种特定的残基。丙氨酸(Alanine)扫描和半胱氨酸(Cysteine)扫描是两种常用的扫描文库类型。
通量
独立的、经100%序列验证的克隆
交付形式
1. 2–5 µg 冻干质粒 DNA
2. 限制性酶切图谱
3. 测序原始数据及比对结果
4. 合成基因(单独或亚克隆至载体中)的序列文件
截短文库
截短突变体文库的构建方法是:从蛋白质的 N 端或 C 端(或两者)特定核心区域周围切除氨基酸。这使得科学家能够精确定位负责蛋白质功能的核心区域。
通量
独立的、经100%序列验证的克隆
交付形式
1. 2-5 µg 冻干质粒 DNA
2. 限制性内切酶酶切图谱
3. 序列比对数据
4. 合成基因的序列文件(单独或亚克隆到载体中)
随机化文库
随机化突变文库允许用户在指定区域内(例如,200bp-1500bp 的 ORF 区域)进行随机氨基酸替换。这些蛋白质可以表达并进行功能分析,从而在蛋白质工程研究中鉴定有益的氨基酸替换。
通量
可直接克隆的 PCR 片段文库或克隆混合文库,最多可包含 10⁹ 个变体。
交付形式
1. PCR 片段文库:2-4 µg 线性双链 DNA(可根据需要通过 5' 和 3' 限制性内切酶位点进行克隆)
2. 克隆混合文库:5-10 µg 冻干质粒 DNA 和甘油保存液,包含最多 10⁹ 个转化子
3. 根据文库大小,对预定数量的克隆进行序列验证(并进行统计分析)
简并文库
生命科学家可以通过多种组合方式构建突变体文库。LIFESCT 提供传统的半随机化 (NNK/NNS) 和完全随机化 (NNN) 突变体文库服务,以支持这项工作。
通量
可直接克隆的 PCR 片段文库或克隆混合文库,最多可包含 10⁹ 个变体。
交付形式
1. PCR 片段文库:2-4 µg 线性双链 DNA(可根据需要通过 5' 和 3' 限制性内切酶位点进行克隆)
2. 克隆混合文库:5-10 µg 冻干质粒 DNA 和甘油保存液,包含最多 10⁹ 个转化子
3. 根据文库大小,对预定数量的克隆进行序列验证(含统计分析)
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